جديد

تنكس أوراق نبات العنب - السيطرة على فيروس أوراق العنب

تنكس أوراق نبات العنب - السيطرة على فيروس أوراق العنب


بقلم: كريستي ووترورث

يوفر العنب المعلق من التعريشات والأشجار غطاء أوراقًا جميلًا وفاكهة وفيرة عندما يكونون سعداء وبصحة جيدة. للأسف ، مشاكل العنب ، مثل فيروس ورق العنب ، ليست شائعة ، مما يجعل زراعة العنب تحديًا كبيرًا. إذا كنت تشك في انحطاط أوراق العنب في مزرعة العنب أو الحديقة ، فتابع القراءة للحصول على معلومات أكثر قيمة.

تنكس ورق العنب

تنكس أوراق نبات العنب هو فيروس شائع ينتقل عن طريق نيماتودا الخنجر. إنه ليس فقط من أشد الأمراض الفيروسية التي تصيب العنب ، ولكنه أقدم الأمراض المعروفة ، وتعود الأوصاف إلى عام 1841. أي نوع من أنواع العنب يمكن أن يصاب بالعدوى ، ولكن كرمة العنب الاوروبي, فيتيس روبيستريس وهجنهم هم الأكثر عرضة. يجب أن تراقب هذا المرض في أي مكان ينمو فيه العنب ، خاصة في الولايات التي تعاني من عدوى معروفة مثل كاليفورنيا وواشنطن وماريلاند وبنسلفانيا ونيويورك وميسوري.

غالبًا ما تظهر النباتات المصابة انخفاضًا بطيئًا وصعوبة في وضع الثمار ، ولكنها دائمًا ما تحمل تشوهًا مميزًا للأوراق. تظهر الأوراق المصابة شكلًا يشبه المروحة بسبب تشوهات في تكوين الوريد ، وتلون أصفر إما في نمط الفسيفساء أو في شرائط على طول الأوردة الرئيسية. يظهر هذا اللون الأصفر بشكل عام في الصيف.

السيطرة على فيروسات نبات العنب

إذا كان العنب مصابًا بالفعل بفيروس ورق العنب ، فقد فات الأوان لفعل أي شيء حيال هذا المرض المأساوي ، ولكن يمكنك منع العدوى في النباتات الصحية من خلال ممارسة أدوات النظافة الجيدة بين جميع نباتاتك. في المستقبل ، يمكنك تجنب هذا المرض عن طريق زراعة أشجار العنب المعتمدة الخالية من الأمراض والتي لها جذور مقاومة للديدان الخيطية في تربة جديدة بعيدة عن موقع العنب المصاب.

على الرغم من أن انتشار الفيروس على نطاق واسع أمر غير شائع في حديقة المنزل ، فكلما كان نظام الصرف الصحي والإدارة لديك أفضل ، قل احتمال أن يصبح فيروس ورق العنب مشكلة منزلية. حافظ على الحشائش محكومة بإحكام حول أي زراعة للعنب للتخلص من نباتات النواقل وإعادة زراعة مناطق العنب بكثافة بنباتات مبيدات النيماتودا ، مثل القطيفة الفرنسية ، للمساعدة في تدمير الديدان الخيطية التي تنقل هذا المرض بسهولة.

المقاومة الحقيقية للفيروس ليست متوفرة حتى الآن في تربية العنب ، لذا فإن النهج المركب للسيطرة على فيروسات ورق العنب هو أفضل رهان لك إذا كنت تأمل في زراعة العنب بنجاح في حديقتك المنزلية. احتفظ دائمًا بأدواتك معقمة ونباتات نظيفة ومقاومة. راقب أيضًا علامات المرض وقم بإزالة أي نباتات مشتبه بها على الفور للحصول على أفضل النتائج.

تم آخر تحديث لهذه المقالة في


خدمة PDF

GRAPEVINE FANLEAF VIRUS PDF

تتسبب العدوى بفيروس العنب nepovirus (GFLV) ، وهو فيروس RNA ثنائي الجزء ذو قطبية إيجابية ينتمي إلى عائلة Comoviridae ، في حدوث اعتلال خلوي واسع النطاق. يتم تحديد الانتقال المحدد لفيروس ورق العنب بواسطة مؤشر Xiphinema المتجه للديدان الخيطية فقط بواسطة بروتين الغلاف الفيروسي. هناك الكثير من فيروسات النبات التي لم يسمع عنها أحد ، ولكن القليل منها معروف على نطاق واسع باسم فيروس العنب. تعلم كيفية التعرف على المريض.

مؤلف: Zulkizuru Tazshura
دولة: كازاخستان
لغة: الإنجليزية (الإسبانية)
النوع: بيئة
تم النشر (الأخير): 28 سبتمبر 2015
الصفحات: 370
حجم ملف PDF: 13.8 ميجا بايت
حجم ملف ePub: 9.88 ميجا بايت
رقم ال ISBN: 119-6-70827-416-4
التحميلات: 24877
سعر: حر* [* التسجيل المجاني مطلوب]
رافع: باجورا

جامعة بوردو. هذا التوازي ليس غير متوقع لأن CPMV و GFLV ينتميان إلى نفس العائلة ويشتركان في العديد من الميزات المشتركة ، من بينها تنظيم جينوم مماثل 2. تشير رؤوس الأسهم في اللوحات B و C و E و F إلى الحيز الفيروسي حول النواة.

بالنسبة لفيروس فسيفساء اللوبيا ، تم وصف تراكم الحويصلات الناجم عن فيروس CPMV المشتق من نظام الغشاء الداخلي في وقت مبكر من قبل de Zoeten et al. على الرغم من وجود بعض مراكز المعجبين في المنطقة المحيطة بالنووية الغنية بالـ ER ، إلا أن العديد منها ظل هامشيًا.


فيروس ورق العنب

احتوت هذه الهياكل على VPg إما كمنتج نضج نهائي أو على الأرجح كسلائف متعددة البروتين تشارك في تكرار الحمض النووي الريبي ويمكن أن تأخذ شكل حلقة أو غطاء أو تظهر متعددة الفصوص.

تم تثبيت الخلايا باستخدام الجلوتارالدهيد ، المنخل ، المبرد بـ NaBH 4 ومعالجتها بالأجسام المضادة الأولية ، تليها المعالجة بالأجسام المضادة الثانوية المقترنة بالكرومات الفلورية Ab1 و Ab2.

افترضنا أن جزء العنب للبروتين P2 يمكن أن يتوسط في نقل مجمعات Grapevone الوليدة من موقعها الأولي في العصارة الخلوية إلى مواقع النسخ المتماثل حول النواة حيث يحدث تكرار RNA2 وانقسام P2 RNA1 يشفر البروتين P1 kD الذي تتم معالجته بواسطة نشاط بروتيني مضمن إلى خمسة بروتينات مطلوبة للنسخ المتماثل ، أي 1A من وظيفة غير معروفة 1B على الأرجح بروتين هليكاز 1C VPg1D و 1E بوليميريز 38 لإثبات ما إذا كانت المجاميع المشتقة من ER متورطة في التكاثر الفيروسي ، تم إجراء تجارب وضع العلامات المزدوجة مع مضادات dsRNA والأجسام المضادة لـ VPg .

لم يلاحظ أي مجاميع VPg في البروتوبلاست المتحولة أو غير المصابة ، كما هو مبين في الشكل.

تم طلاء الشبكات الإلكترونية المجهرية المطلية بـ Formvar أولاً بأجسام مضادة مضادة لـ VPg ذات مناعة تقارب ومن ثم تطفو على قسامات من الكسور المتدرجة مجتمعة ثلاثة في ثلاثة.

يحفز بروتين فيروسي بشري ، بروتين فيروس شلل الأطفال 2BC ، تكاثر الأغشية ويمنع مسار خروج الخلايا في الخميرة Saccharomyces cerevisiae. ربما تضمن مثل هذه المجمعات حماية الحمض النووي الريبي الفيروسي الذي يتم تصنيعه من التحلل بواسطة RNases الخلوية.

في 48 ساعة بعد الكهرباء ، تم إصلاح البروتوبلاست مع الجلوتارالدهيد على النحو التالي. إدخال PDB 2y26 [1] مجموعة تصنيف الفيروسات: تتأثر جودة الفاكهة نتيجة لانخفاض محتوى السكر والحموضة القابلة للمعايرة.

مرض تنكس أوراق العنب هو عنب العنب عن طريق فيروس ورق العنب GFLVa من مجموعة الفيروسات النبوية. على عكس البروتينات المشاركة في التكاثر الفيروسي ، فإن بروتين الحركة 2B ، وبدرجة أقل ، بروتين الغلاف 2C لم يقتصران على الحيز الفيروسي ولكن تم نقلهما نحو محيط الخلية ، وهو اكتشاف يتوافق مع دورهما في الانتقال من خلية إلى أخرى. حركة الخلايا لجزيئات الفيروس.

يتم تقليل مجموعات الفاكهة بشكل كبير وعددها مع النضج غير المنتظم. يقودنا التوحيد المثالي لإشارات الرنا المزدوج الجديلة وإشارات الحمض النووي الريبي المُصنَّع حديثًا داخل مجاميع ER ، جنبًا إلى جنب مع الاستبعاد من هذه المجاميع من Golgi التي ظلت غير متأثرة بشكل أساسي ، إلى استنتاج أن ER هو المساهم الرئيسي في تكوين الحيز الفيروسي حيث يحدث تكاثر الفيروس .

حدوث تكاثر فيروسات نبات العنب على الأغشية المشتقة من شبكية إندوبلازمية

وضع العلامات والكشف عن الحمض النووي الريبي الناشئ. علاج BFA والسيرولين. تم تكييف الإجراء من Bienz et al. بالنسبة لـ FDA ، كانت المعلمات على النحو التالي: كانت هذه الوريدات تذكرنا جدًا في كل من الشكل والحجم لتلك المعزولة بواسطة ISEM من الخلايا المصابة بفيروس شلل الأطفال 45. تم حصاد الخلايا في 48 ساعة p. تم استلامه في 27 ديسمبر وتم قبوله في 3 يونيو.

مرض تنكس أوراق العنب - تمدد

بلغ التأثير المرضي الخلوي المحدد لعدوى GFLV ذروته في استنفاد ER القشري تقريبًا مصحوبًا بتراكم تدريجي لمجموعات ER الناجم عن الفيروس حول النواة.

تم العثور أحيانًا على إشارة خلفية باهتة بسبب الأجسام المضادة لـ VPg في محيط الخلية.

هذا التوازي ليس غير متوقع لأن CPMV و GFLV ينتميان إلى نفس العائلة ويشتركان في العديد من ميزات viruw ، من بينها تنظيم جينوم مماثل 2. بالإضافة إلى ذلك ، اقتصرت أكوام Golgi على محيط هذه المجاميع الشكل.


عنب (فيتيس spp.) - أمراض الفيروسات

تتوسع المساحات المتغيرة على الأوراق وتندمج مع الوقت لتصبح بقع حمراء أو أرجوانية ضاربة إلى الحمرة والتي تظهر بشكل لافت للنظر في نهاية الموسم. على الرغم من أنه قد يتم الخلط بين هذه الورقة ولفائف أوراق المرض الفيروسية ، إلا أنها كانت سلبية بالنسبة للورقة وإيجابية للبقعة الحمراء.

OSU Plant Clinic Image ، 2013.

أعراض البقعة الحمراء على Pinot Noir (صورتان علويتان) من Willamette Valley و Merlot (صورتان سفليتان) من Rogue Valley.

لاحظ أعراض لفافة الأوراق على الأوراق.

مجموعة شرائح OSU الخاصة بعلم أمراض النبات ، 1969.

السبب تم العثور على الفيروسات المرتبطة بمرض ورق العنب ومرض لحاء الفلين في مزارع الكروم في ولايتي أوريغون وواشنطن. ينتشر مرض أوراق الشجر من خلال ناقلات الحشرات ، في حين أن لحاء الفلين إما لا يتحرك في مزارع الكروم أو يتحرك ببطء شديد. من بين الفيروسات المرتبطة بمرض ورق الأوراق ، كان GLRaV-3 هو الفيروس الأكثر انتشارًا في الدراسات الاستقصائية. إن بق العنب الدقيقي ، كما هو موضح في واشنطن وكاليفورنيا ، ينقل هذا الفيروس. هذا البق الدقيقي شائع في جنوب ولاية أوريغون وشرق أوريغون ومناطق إنتاج نهر كولومبيا. لذلك ، من الأهمية بمكان أن يستخدم المزارعون الأخشاب المعتمدة فقط عند إنشاء مزارع الكروم. تخضع جميع أنواع العنب التي تدخل أوريغون وواشنطن للحجر الصحي ويجب أن تكون مصدق عليها خالية من فيروسات أوراق الشجر. مع تطعيم المزيد من الكروم على جذور الجذر للحماية من Phylloxera ، ستصبح هذه الفيروسات أكثر ضررًا إذا تم تأسيسها. سوف يتسبب Leafroll في ظهور أعراض في النباتات غير المطعمة ولكنه قد يتسبب في نخر اتحاد الكسب غير المشروع في النباتات المطعمة وكذلك لحاء الفلين. أصناف Vitis vinifera التي تحمل لحاء الفلين لا تظهر عليها الأعراض حتى يتم تطعيمها على جذور الجذور الأمريكية.

الفيروس المرتبط بنقر الجذع (RSPaV) موجود في ولايتي أوريغون وواشنطن ولم يتم إدراجه كفيروس قابل للحجر الصحي. لا يزال مكونًا مهمًا في برنامج اعتماد واشنطن ، على الرغم من أن كاليفورنيا وكندا وفرنسا وألمانيا ليس لديها هذا الفيروس مدرجًا على أنه مقيد في خطط الاعتماد الخاصة بهم. من المقبول عمومًا أن RSPaV هو فيروس صغير ، على الرغم من أن تأثيره في حالات العدوى المختلطة أو المتعددة غير واضح.

من المعروف أن سبعة فيروسات تنتقل بالديدان الخيطية (Nepoviruses) تصيب أشجار العنب في أمريكا الشمالية ، بما في ذلك: فيروس موزاييك أرابيس ، وفيروس برقش أوراق العنب ، وفيروس موزاييك وردة الخوخ ، وفيروس توباكو رينغ سبوت ، وفيروس حلقة الطماطم السوداء ، وفيروس حلقة الطماطم. في دراسة استقصائية لمزارع العنب في ولاية أوريغون المعروفة بوجود نيماتودا Xiphinema americanum ، تم اكتشاف فيروس حلقة حلقات الطماطم فقط ، ثم تم اكتشافها فقط في عدد قليل من مزارع الكروم في وادي ويلاميت. ومع ذلك ، فقد تم اكتشاف فيروس توباكو رينغ سبوت وفيروس ورق العنب في العديد من مزارع الكروم في وادي ياكيما بواشنطن في النباتات التي تظهر أعراض انحطاط / تدهور أوراق الشجر. ليس من المتوقع أن تكون أوراق المعجبين مشكلة في PNW ، حيث أن المتجه ، مؤشر X ، لم يتم العثور عليه في استطلاعات الرأي في أوريغون وواشنطن. وبالمثل ، فإن ناقل الديدان الخيطية لفيروس الموزاييك العربي ليس منتشرًا على نطاق واسع في أمريكا الشمالية. يجب أن تكون جميع أشجار العنب التي تدخل أوريغون وواشنطن خالية من هذه الفيروسات النبوية.

تم الإبلاغ عن مرض جديد سببه فيروس البقعة الحمراء لعنب العنب (GRBV) لأول مرة في عام 2012. حدث الاكتشاف عندما تم تحليل أشجار العنب ذات الأعراض الورقية الحمراء والتي كانت سلبية بالنسبة للفيروسات المرتبطة بلفائف ورق العنب (1-10) (GLRaV) بحثًا عن فيروسات جديدة محتملة . GRBV هو نوع من جنس Grablovirus الجديد ، في عائلة Geminiviridae الذي ينتقل عن طريق الكسب غير المشروع. يجب أن تكون جميع أشجار العنب التي تدخل أوريغون وواشنطن خالية من GRBV.

الأعراض ، تسمى Leafroll أيضًا الورقة الحمراء أو مرض الإمبراطور الأبيض ، وتحمر الأوراق السفلية لأصناف الفاكهة الداكنة في سبتمبر وأكتوبر. قد تتحول أوراق الشجر من أصناف الفاكهة البيضاء إلى اللون الأصفر في هذا الوقت. تشمل الأعراض الأخرى تأخر ترقيم الأوراق في الربيع ، وتقليص الأوراق ، وإنتاج مجموعات أقل وأصغر من التوت أقل من المعتاد في المواد الصلبة الذائبة ، ونمو الكروم الأقل نشاطًا في الظروف المعاكسة. عنب أصناف الفاكهة الحمراء لا يلون جيدًا عند إصابته بـ GLRaV. تحاكي أعراض نقص البوتاسيوم العديد من الأعراض التي تسببها GLRaV. يمكن استخدام تطهير الوريد المرتبط بمرض لفائف الأوراق لتمييزه عن تلون الأوراق المماثل الناجم عن عوامل الإجهاد الأخرى.

البقعة الحمراء - في أصناف عنب العنب الأحمر ، تظهر هذه الأعراض في البداية على شكل مناطق صغيرة غير منتظمة حمراء اللون بين الأوردة الرئيسية على الأوراق الناضجة في الجزء القاعدي من مظلة الكروم المصابة ، وتتطور الأعراض على الأوراق أعلى العصي مع تقدم الموسم . تتوسع المساحات المتغيرة على الأوراق وتندمج مع الوقت لتصبح بقع حمراء أو أرجوانية ضاربة إلى الحمرة والتي تظهر بشكل لافت للنظر في نهاية الموسم. في بعض الأصناف تصبح الأوردة حمراء على عكس الأوردة الخضراء التي عادة ما يتم ملاحظتها مع مرض ورق العنب. ومع ذلك ، يمكن الخلط بين أعراض هذا المرض ومرض ورق العنب. في هذا الوقت ، يبدو أن هناك تباينًا كبيرًا في درجة الاحمرار اعتمادًا على الصنف والجذور. تتباين التقارير حول تأثير GRBV على التغيرات في جودة الفاكهة بشكل كبير مع انخفاض Brix من 0 إلى 5 بالإضافة إلى التغيرات في درجة الحموضة وملف الفينول للعصير. الأصناف البيضاء الموجبة للفيروس لم تظهر أعراض احمرار الأوراق ، وفي حالة نبات شاردونيه ظهر اصفرار الأوراق وبعض النخر في أواخر الموسم تأثر العصير بشكل مشابه للعنب الأحمر.

ترتبط جميع فيروسات نيبوفيرس بفاكهة فقيرة في كروم العنب. العناقيد السائبة والتوت الصغير الوفير يميز عدوى الفيروس. يمكن أن يتسبب فيروس عصبة الطماطم في نخر اتحاد الكسب غير المشروع في الكروم المطعمة ، ويمكن أن يؤدي إلى تدهور النباتات مما يؤدي إلى موت النبات في 3-5 سنوات.

من الأفضل رؤية أعراض Fanleaf في وقت مبكر من موسم النمو. غالبًا ما يتضاءل النمو الجديد في الكروم المصابة على العكازات الضعيفة والمسطحة والمعوجة. الأوراق الصغيرة مرقطة ومشوهة ، وتظهر تسننًا مفرطًا (حافة ورقة مسننة بشكل غير طبيعي) وجيب عريض عند السيقان. تشبه هذه الأعراض معًا مروحة مغلقة جزئيًا ، مثل إصابة 2،4-D. تسبب بعض السلالات أنماطًا صفراء زاهية على الأوراق ، غالبًا بدون تشوه الأوراق المرتبط بسلالات فيروسات ورق العنب الأخرى. فيروس الوريد الأصفر لعنب العنب هو سلالة أخرى ، فهو ينتج شرائط صفراء أو بيضاء مميزة على طول عروق الأوراق معظم الموسم. يبدو أن توزيع إجهاد الوريد الأصفر محدود للغاية في هذا الوقت.

يتسبب لحاء الفلين في حدوث عدم توافق في اتحاد الكسب غير المشروع. تشبه أعراض الأوراق أعراض لفائف الأوراق ولكنها تكون أكثر حدة في بعض الأصول الجذرية. قد تصاب الأوراق الموجودة على أصناف مثل Pinot Noir بداء اصفرار أصفر قبل أن يتحول إلى اللون الأحمر. قد ينتفخ الخشب الموجود في قاعدة العصي قليلاً ، مما يتسبب في انقسام اللحاء. اعتمادًا على الصنف ، قد تحدث أيضًا حفر خشبية مختلفة. على أشجار العنب ذات الجذور الذاتية ، تكون أعراض لحاء الفلين خفيفة للغاية.

يُشتبه في أن الفيروس المرتبط بنقر الجذع يسبب انخفاضًا بطيئًا في Vitis vinifera. الكروم المصابة أصغر من تلك السليمة ، لكن الأوراق تبدو طبيعية. وقد ارتبط تأخر النضج وانخفاض الغلة بهذه المشكلة. تتطور جذور جذور V. rupestris وهجائنها إلى تنقير في نسيج الخشب ، لوحظ على الأنسجة الخشبية بعد إزالة اللحاء. من السهل الخلط بين أعراض لحاء الفلين. على أشجار العنب ذات الجذور الذاتية ، يكثف RSPaV الأعراض المصاحبة لمرض لفائف الأوراق.

  • ازرع مخزونًا صحيًا. لا يمكن شحن سوى القصاصات غير المقطوعة المعتمدة الخالية من أوراق المروحة وورقة الأوراق إلى ولايتي أوريغون وواشنطن. تتوفر نسخ من معظم الجذور والأصناف التي تم اختبارها ووجد أنها خالية من جميع الفيروسات المعروفة.
  • ينتقل فيروس أوراق نبات العنب وفيروس توباكو رينغ سبوت وفيروس طماطم القرع في التربة عن طريق بعض الديدان الخيطية من جنس Xiphinema ولكن ناقل المروحة (X. index) لم يتم العثور عليه في PNW. جذور العنب القديمة المصابة بالورقة تستمر لسنوات عديدة في التربة وتعمل كمستودعات لهذه الفيروسات. لذلك ، لا تعيد زراعة العنب في أرض موبوءة لمدة 10 سنوات ما لم تستخدم إجراءات إراحة خاصة ثم تبخيرها بعمق.
  • السيطرة على البق الدقيقي والمقاييس مهمة في مزارع الكروم مع أوراق الشجر المؤكدة. راجع دليل PNW Insect Management للحصول على التفاصيل.
  • إزالة وتدمير الكروم المصابة بالفيروس.
  • الحفاظ على صحة مزارع الكروم وحيويتها من خلال التغذية الجيدة والري المناسب وتقليل حمل المحاصيل لتقليل الضغوط المادية والبيئية.


الأكثر مبيعًا في أمراض وأمراض النبات

علم أمراض النبات وأمراض النبات

الآفات والأمراض والعلل وحلفاء النباتات الأسترالية

النباتات والمناخ المحلي

البستنة الدفيئة

الترايكوديرما

آفات وأمراض واضطرابات نباتات الحدائق

طرق في أبحاث علم الأحياء في Rhizosphere

البستنة شهرًا بعد شهر

علم الفيروسات التطبيقي

كيفية زراعة الماريجوانا في الداخل

الإدارة المتكاملة للآفات والأمراض في محاصيل الدفيئة

مقدمة عن الفطريات

طبيعة المجتمعات النباتية

المناعة الفطرية للنبات: المجلد 51

كتيب تحديد أمراض النبات وإدارتها

الطرق الجزيئية في تشخيص أمراض النبات

مسببات الأمراض الفطرية للنباتات

تقنيات فهرسة العوامل الممرضة: المجلد 23

التاريخ التطوري للنيماتودا

جمعيات الحشرات والفطريات

صياغة المبيدات الحيوية الميكروبية

Aphid Ecology نهج التحسين

علم أمراض النبات وأمراض النبات

أمراض النبات والأمن الحيوي

مناهج التكنولوجيا الحيوية في المكافحة الحيوية لمسببات الأمراض النباتية

كتيب أمراض النبات في Westcott

المكافحة البيولوجية للنيماتودا المتطفلة على النبات:

علم الأورام النباتية

علم بيئة أمراض الحياة البرية

إدارة الآفات الحشرية للزراعة

تحقيق الزراعة المستدامة للشعير

الفيروسات النباتية

مفاهيم علم أمراض النبات وتمارين المختبر

كيف ينمو القنب

مسببات الأمراض النباتية الميكروبية

أمراض محاصيل الحبوب الصغيرة

النيماتودا المتطفلة على النبات في الزراعة شبه الاستوائية والمدارية

Phytoplasmas: البكتيريا المسببة للأمراض النباتية - II


الكشف عن المتغيرات المتعددة لفيروس ورق العنب في الديدان الخيطية المفردة Xiphinema

الكشف المحدد عن فيروس ورق العنب (GFLV) RNA-1 (a) و RNA-2 (b) بواسطة RT-PCR في كروم العنب والديدان الخيطية (P: تجمع 30 نيماتودا و i: نيماتودا مفردة). يتوافق L مع السلم ، و + و - للتحكم الإيجابي والسلبي على التوالي. يشار إلى حجم كل منتج في أزواج قاعدية (bp) على الجانب الأيسر من كل هلام.

يتم تحديد تكوين متغيرات GFLV عن طريق تعدد الأشكال لطول جزء التقييد (RFLP) على أمبليكونات RT-PCR الخاصة بـ RNA-1 و RNA-2 ، من كروم العنب VA6 و VA7 و VA8 ومن النيماتودا التي تتغذى على هذه الكروم (P: تجمع من 30 نيماتودا وأنا: الديدان الخيطية المفردة). تم تحديد الطول النظري (في bp) للأجزاء المختلفة الناتجة عن الهضم المقيد لـ amplicon 1 (a) و amplicon 2 (b) لكل متغير جزيئي من تسلسل GFLV de novo المجمع. لوحظت ملامح RFLP للأمبليكون 1 (ج) و 2 (د). يشار إلى الحجم في أزواج القاعدة (bp) لسلم 100 bp من Promega ، على الجانب الأيسر من كل هلام. يتوافق المزيج مع عينة اصطناعية تحتوي على كميات متساوية من إجمالي مستخلصات الحمض النووي الريبي من VA6 و VA7 و VA8. يتم عرض الجزء غير المتوقع لـ VA8 amplicon 2 (*). تمت الإشارة إلى ثلاثة أنواع مختلفة من ملفات تعريف RFLP (A و B و C) التي تمت ملاحظتها من أجل amplicon 2 للديدان الخيطية المفردة أسفل اللوحة.

مقارنة لمحات RFLP والحمل الفيروسي لثمانية عينات مختلفة من الأوراق والجذور من عقل كرمة (VA6-A و VA6-B). تم تحديد الطول النظري للأجزاء المختلفة الناتجة عن الهضم المقيد لـ amplicon 1 (a) و amplicon 2 (b) لكل متغير جزيئي لـ GFLV de novo المجمعة من الكرمة VA6. لوحظت ملامح RFLP للأمبليكون 1 (ج) و 2 (د). يشار إلى الحجم في أزواج القاعدة (بي بي) على الجانب الأيسر من كل هلام. تم التعبير عن الحمل الفيروسي (هـ) المقدّر بالتقدير الكمي المطلق لـ RNA-1 بواسطة RT-qPCR في جزيئات / نانوغرام من إجمالي الحمض النووي الريبي كما هو موضح سابقًا [32]. تم حساب النسب بين العينات من نفس الأنسجة ونفس النبات باستخدام العينة ذات أقل كمية فيروسية كمقام. تم حساب المتوسط ​​والخطأ المعياري داخل مقصورة (ورقة أو جذر) لكل نبات ، مما يسمح بإجراء مقارنة مباشرة بين الأعضاء والنباتات.

الأشجار التطورية على أساس طريقة الانضمام المجاورة بعد محاذاة التسلسلات المقابلة لـ amplicon 1 (a) و amplicon 2 (b). تكون التسلسلات التي تم الحصول عليها من النباتات المصابة باللون الرمادي لتسلسلات GFLV المعروفة المسترجعة من GenBank وبخط عريض لتلك من مصادر العنب الثلاثة (VA6 و VA7 و VA8) كما تم استنتاجه من تحليلات RNAseq الخاصة بنا. يتم الحصول على التسلسلات المكتسبة من الديدان الخيطية والتي تم الحصول عليها عن طريق تسلسل Sanger لاستنساخ الأمبليكون باللون الأخضر (مجموعة من 30 نيماتودا P1 و P2) ، باللون الأحمر (نيماتودا مفردة i9) وباللون الأزرق (نيماتودا مفردة i11). المتغيرات الجزيئية GFLV والمستنسخات في كل كليد. يتم تمثيل تركيبة المتغيرات الجزيئية GFLV المستخلصة من RNAseq لكل نبات باللون الأسود. بالنسبة للديدان الخيطية ، يتم استخدام نفس رمز اللون على النحو الوارد أعلاه (الأخضر والأحمر والأزرق) ويتم إعطاء نسب الحيوانات المستنسخة التي تنتمي إلى كليد (على إجمالي عدد الحيوانات المستنسخة المتسلسلة لكل عينة).


فيروس ورق العنب (GFLV): أجسام مضادة محددة تمنح GFLV و فيروس الموزاييك العربي (ARMV) المقاومة في نيكوتيانا بنتاميانا

معهد التكنولوجيا الحيوية الجزيئية (علم الأحياء السابع) ، جامعة RWTH آخن ، Worringerweg 1 ، 52074 آخن ، ألمانيا

RLP AgroScience GmbH، AIPlanta - Institute for Plant Research، Breitenweg 71، 67435 Neustadt a.d. Weinstraße ، ألمانيا

معهد التكنولوجيا الحيوية الجزيئية (علم الأحياء السابع) ، جامعة RWTH آخن ، Worringerweg 1 ، 52074 آخن ، ألمانيا

RLP AgroScience GmbH، AIPlanta - Institute for Plant Research، Breitenweg 71، 67435 Neustadt a.d. Weinstraße ، ألمانيا

معهد التكنولوجيا الحيوية الجزيئية (علم الأحياء السابع) ، جامعة RWTH آخن ، Worringerweg 1 ، 52074 آخن ، ألمانيا

معهد فراونهوفر للبيولوجيا الجزيئية والبيئة التطبيقية (IME) ، Forckenbeckstrasse 6 ، 52074 آخن ، ألمانيا

معهد فراونهوفر للبيولوجيا الجزيئية والبيئة التطبيقية (IME) ، Forckenbeckstrasse 6 ، 52074 آخن ، ألمانيا

معهد التكنولوجيا الحيوية الجزيئية (علم الأحياء السابع) ، جامعة RWTH آخن ، Worringerweg 1 ، 52074 آخن ، ألمانيا

RLP AgroScience GmbH، AIPlanta - Institute for Plant Research، Breitenweg 71، 67435 Neustadt a.d. Weinstraße ، ألمانيا

معهد التكنولوجيا الحيوية الجزيئية (علم الأحياء السابع) ، جامعة RWTH آخن ، Worringerweg 1 ، 52074 آخن ، ألمانيا

RLP AgroScience GmbH، AIPlanta - Institute for Plant Research، Breitenweg 71، 67435 Neustadt a.d. Weinstraße ، ألمانيا

معهد التكنولوجيا الحيوية الجزيئية (علم الأحياء السابع) ، جامعة RWTH آخن ، Worringerweg 1 ، 52074 آخن ، ألمانيا

معهد فراونهوفر للبيولوجيا الجزيئية والبيئة التطبيقية (IME) ، Forckenbeckstrasse 6 ، 52074 آخن ، ألمانيا

معهد فراونهوفر للبيولوجيا الجزيئية والبيئة التطبيقية (IME) ، Forckenbeckstrasse 6 ، 52074 آخن ، ألمانيا

ملخص

فيروس ورق العنب (GFLV) هي واحدة من أكثر مسببات الأمراض تدميرا في العنب. في هذه الدراسة ، أنشأنا أجسامًا مضادة وحيدة النسيلة مرتبطة بشكل خاص ببروتين الغلاف لـ GFLV. الجسم المضاد FL3، والتي ارتبطت بشدة بـ GFLV وأظهرت تفاعلية متصالبة مع فيروس الموزاييك العربي (ArMV) ، لبناء جزء الجسم المضاد أحادي السلسلة scFvGFLVcp ‐ 55. لتقييم إمكانات هذا الجزء المتغير أحادي السلسلة (scFv) لمنح مقاومة الفيروسات بوساطة الجسم المضاد ، المعدلة وراثيًا نيكوتيانا بنتاميانا تم إنشاء النباتات التي تراكمت فيها scFv في العصارة الخلوية. تم تحقيق مستويات البروتين المؤتلف تصل إلى 0.1٪ من إجمالي البروتين القابل للذوبان. ت1 و ت2 تمنح السلالات حماية جزئية أو كاملة ضد GFLV عند التحدي مع الممرض الفيروسي. كانت مقاومة GFLV في النباتات المعدلة وراثيًا مرتبطة ارتباطًا وثيقًا بمستويات تراكم scFvGFLVcp ‐ 55 ، مما يؤكد أن جزء الجسم المضاد كان وظيفيًا في بلانتا ومسؤول عن مقاومة GFLV. بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت النباتات المعدلة وراثيًا التي تمنح الحماية الكاملة لـ GFLV تسامحًا معززًا بشكل كبير لـ ARMV نوضح الخطوة الأولى نحو التحكم في تنكس أوراق العنب ، حيث يمكن أن يكون scFvGFLVcp ‐ 55 مرشحًا مثاليًا للتوسط في مقاومة الفيروسات الجديدة.


شاهد الفيديو: Stuffed grape leaves in instant pot. ورق عنب في طنجرة الضغط